办法: 开辟一种踏实的成东说念主原代肝细胞分离、培养、冻存措施苍井空电影， 为肝细胞移植、生物东说念主工肝相沿系总揽疗急慢性肝病以及肝细胞体外欺诈模子提供潜在的肝细胞资源.

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措施: 20例供肝接受离体两步胶原酶灌输时期分离成东说念主原代肝细胞. 选择7个不同的预培养时期点(2、6、12、24、36、48和72 h)， 分离所获肝细胞按上述不同预培养时期在4 ℃东说念主无血清培养基(HepatoZYME-SFM)中培养， 然后收罗预培养肝细胞改换到含100 mL/L胎牛血清和DMSO的HepatoZYME-SFM中， 再立即放入-80 ℃异丙醇冷冻盒过夜， 次日进入液氮. 分析比较各肝细胞在解冻后细胞活力率、贴壁率、白卵白分泌及尿素合成.

遵守: 在部分肝叶切除后使用离体两步胶原酶灌流时期分离所得肝细胞活率和贴壁率区别是75.0%±4.6%和72.0%±6.0%. 4 ℃预培养12或24 h被施展是最适预培养时期， 这两个时期点的白卵白分泌高于其他时期点(P<0.05). 与立即冷冻组比较较， 预培养12或24 h肝细胞解冻后活力(61.4%±4.8%， 62.0%±5.6% vs 53.4%±4.2%)、贴壁率(63.2±5.8%， 62.6±3.6% vs 55.2±4.6%)、白卵白分泌及尿素合成水平显着提升(均P<0.05).

论断: 东说念主肝细胞在冷冻前4 ℃预培养12-24 h不错赢得较理念念的肝细胞， 为药理毒理学、生物东说念主工肝以及细胞调养的临床欺诈提供了可能性.